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人工授精的操作规程细则

2023-08-03 10:46:21 0

一.准备工作Haj1. 将所用的人工受精器材在前一天进行消毒。(蒸煮消毒30分钟)Haj2. 在采精前一小时消毒、更衣进入化验室。Haj3. 打扫卫生,包括所有工作台、墙面和地面,保持室内清洁。启动空调,将实验室的温度控制在22-24℃之间。Haj4. 打开恒温水槽,预热到37℃,准备好足够的稀释液
一.准备工作Haj1. 将所用的人工受精器材在前一天进行消毒。(蒸煮消毒30分钟)Haj2. 在采精前一小时消毒、更衣进入化验室。Haj3. 打扫卫生,包括所有工作台、墙面和地面,保持室内清洁。启动空调,将实验室的温度控制在22-24℃之间。Haj4. 打开恒温水槽,预热到37℃,准备好足够的稀释液,放入恒温水槽中。Haj5. 把所有的采精器皿放在预热箱中,预热到37℃。Haj6. 准备好采精怀,放入预热箱中。Haj7. 准备好检测设备:恒温载物台、显微镜、恒温冰箱。Haj8. 准备好笔记本、、笔、采精保鲜袋(容量1L)、橡皮筋、过滤沙布等。Haj9. 稀释液要在使用前一小时配好放在预热箱中,预热到37℃.Haj10. 当采精员准备采精时,把预热好的采精杯放入保温运送箱中,通过传递窗口送到采精区域。Haj二、精液的采集Haj1. 把公猪赶到采精区,然后诱导公猪爬上假母猪台。Haj2. 把采精杯从窗口中取出,放在一个安全并且容易拿到的地方。Haj3. 用干净的纸巾、消毒液(无刺激性的)对公猪的包皮囊进行擦洗。若公猪的阴毛过长,要对其进行修剪,然后消毒。Haj4. 用手握住阴茎,引诱公猪把全部阴茎伸出。Haj5. 把第一次射出液体流在地上,然后用生理盐水(0.7%)冲洗干净阴茎头。Haj6. 当奶油状乳白色的液体开始流出来时,再用采精杯进行采集。在采集过程中,手握阴茎的力度要适当,避免损伤公猪的阴茎,直到公猪完全停止射精。Haj7. 迅速把采集好的采精杯传递至化验室,不能拿掉过滤纱布。Haj8. 让公猪自己从假母猪台上下来(不要强行驱赶)。把公猪放回原位,准备下一头猪的采精。Haj9. 需要注意:很多精液从一开始采集时就容易受污染,破坏了精液的质量,我们必须在采集的过程中保证精液免受外界不良因素的影响。Haj三、精液处理和质检Haj1. 对采集好的精液放进预热好的烧杯中进行检验。Haj2. 观察精子的颜色和味道:奶白色而不是粉红色,带咸腥味。Haj3. 精子的密度:用专用的精子计数器来计算出每亳升原浆精液中有多少亿个精子(每毫升8千万至8亿个精子)。Haj4. 精子的活力:一般用一百倍的显微镜来估算精子活力的百分比, 超过70 %以上有活力认为是正常的。Haj主要观察玻片的边缘有几层涟漪:HajA、 “+ + +”表示精子灵活,活动时能产生涟漪。HajB、 “+ +”表示能看见精子的尾部。HajC、 “+” 表示精子能迟缓来回摆动。HajD、 “+ ”表示能动弹,但不能游动,就是原地打转。HajE、 “ ”表示精子已僵死。Haj备注:滴精液时要滴在圆鼓上,检查时看精子周围的情况,一般情况下边缘有三层涟漪,密度中等,那么活力就是70+ + + ,如果是4-5层,活力就是75+ + + ,如果是5层以上,活力就是80-85+ + + ,正常可用的精子不得少于两层涟漪。 Haj5. 检查精子的畸形率:一般用400倍的显微镜来观察。畸开率不能超过20% 。Haj⑴将稀释好的精液取1ml放入试管中,再用吸管吸取10%福尔马林1ml 放入试管中混合均匀。Haj⑵从试管瓶中取1滴瓶中的精液滴在盖玻片上翻扣在载玻片上。Haj⑶将做好的载玻片放置于载物台上卡住,先用100倍镜头确精子的所在位置,再放大400倍按照从左到右、从上到下数333 条精子同时记录异常精子。(精子的异常情况可分为:头冒 A、头部H、颈部N、中部M、尾部T、未成熟TM)从333条精子中看出各种异常的数目,每一条代表0.3(例如:“A”2条就是0.6)Haj四、精液的稀释与保存Haj(一) 盐水的配制:配种采精时所需要的盐水浓度为0.7%Haj(二) 稀释精液HajA:将准备装精子的精液瓶用稀释液刷一下然后把稀释液倒干净。精液瓶上放好纱布,将检查好的精液沿瓶壁缓缓倒入瓶中。 Haj B:量取稀释液温度。先将温度记用冷水冲洗干净,再用稀释液冲洗。然后把冲洗好的温度计插入稀释液中量取加热后的温度。使稀释液的温度与精液的温度一致。Haj C:加入稀释液时要缓慢,沿瓶壁加入同时转动精液瓶,使精液与稀释液混合均匀。HajD:根据精子的密度与活力情况稀释。一般呈1:1稀释,对精子稀的不宜加太多的稀释液。否则会影响受胎及产仔效果。例如:原浆精液是300ml,活力是70+ + + ,可加稀释液600ml,如果活力是75+ + + ,可加稀释液700-800ml;如果活力是80+ + + ,可加稀释液900-1000 ml。HajE:把稀释好的精液放到磁力搅拌器上搅拌均匀,接种环在酒精灯上消毒冷却后,取一滴精液滴在盖玻片上翻扣放在显微镜下用100倍的镜头观察精子活力情况。再用400倍的显微镜观察精子尾部摆动情况。HajHajF:保存:把稀释好的精液放入和水温相等的容器中,水的温度不能高于精液的温度,并且水位要刚刚盖过精液面。因为水 是良好的缓释介质,不会使精液温度变化过大。温度在15-18℃保存不能超过3天。Haj五、精液的运输Haj分装好的精液从恒温箱中取出后,要迅速放入保温箱内并盖好保温箱的盖子,在运输途中尽量避免阳光直射和强烈震动 Haj
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