哺乳仔猪唾液中甲型流感病毒（IAV）的监测应用分析
引言
甲型流感病毒（IAV）是一种危害现代养猪业的呼吸道感染病毒，可以在哺乳仔猪等猪群里呈地方性传播。这意味着，该病的传播和感染也可以发生在有着母源抗体保护的仔猪。本研究的目的是通过检测几窝哺乳仔猪唾液样品中的IAV，以监控该病在种猪群的感染情况，并对此方法的可行性进行评估。
材料和方法
本研究选用4组免疫过自家苗的商品种猪。后备母猪分别于成年后9周龄、12周龄和24周龄各接种疫苗1次，并在产仔1周后再免1次。随机采集4组母猪所产仔猪断奶前24小时的唾液样品600份，仔猪断奶后还需采集母猪的血清样本。通过病毒分离、定量RT-PCR检测、分型和测序等方法检测IAV。用核蛋白阻断ELISA试剂盒和核蛋白同型特异性试验（免疫球蛋白M，免疫球蛋白A和免疫球蛋白G）检测母猪血清和仔猪唾液样品中的甲型流感病毒核蛋白（NP）抗体。
结果
600份仔猪唾液样本的病毒分离结果全为阴性。经2所诊断实验室用定量RT-PCR（qRT-PCR）检测，25份唾液样品呈阳性，将其中18份样品送去测序，测其中血凝素（HA）、神经氨酸酶（NA）和基质（M）的基因序列，剩余7份样品量不足。测序结果为：18份样品的M基因均测序成功，未测到HA和NA的基因序列。遗传分析表明，M基因序列与基因库一致（GenBank登记号：KF487544），属于猪流感病毒M基因（TRIGM）的三元重组。得到的M基因序列与基因库中以前提交的序列JX444793/A/swine/Ohio/A01203624/2012（H3N2）相同。各类型阳性样品的IgM和IgA累计比例差异显著。母猪血清样品中，IgM和IgA为阳性的样品比例均显著高于仔猪唾液样品(p<0.01)。各类型样品的IgG和阻断ELISA阳性结果显著不差异。
结论与讨论
在已经接种的母猪群里，可通过收集哺乳仔猪的唾液样品检测出IAV的流行情况。本研究建议通过检测唾液样品来监控猪群的IAV感染情况和发现隐性带毒小猪。因此，利用哺乳仔猪唾液样品可以轻松有效地监控猪群特别是个体猪的流感状况，且使用较少的唾液样品就能检测。
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