一、实验室管理规范3bM

人工授精实验室是精液检查、处置、贮存的场所 , 为了生产出优质、符合输精要求的精液 , 一定要把好质量关，保证每一份精液的活力不低于 70 ％ . 特对实验室日常工作做如下规定 .3bM

1. 实验室要求整洁、干净、卫生，每周完全清洗一次 .3bM

2. 非实验室工作人员在正常情况下不准进入实验室 , 采精员也不准进入实验室。3bM

3. 所有仪器设备应在仔细阅读说明书后 , 由专人按操作规程使用和维护保养 : 特别是石英蒸馏水制造器 , 使用时更应有人看护 , 注意人身平安 .3bM

4. 各种电器设备应按其要求选择适应插座 , 除冰箱、精液保存箱外 , 一般电器要求人走断电。干燥箱无人时设定温度不应高于 100 ℃ 。3bM

5. 物品器皿清洗消毒的方法 : 采精器皿和精液稀释器皿 , 以及采精手套均采用一次性物品。3bM

6. 稀释液的配制、精液检查、稀释、分装一定按人工授精操作规程进行。3bM

7. 采精室与实验室之间的传送口的两侧窗只有在传送物品时才干按先后顺序开启使用3bM

8. 实验室地板、实验台保持干燥清洁。3bM

9. 下班离开实验室之前一定检查电源、水龙头、门、窗是否关闭好，确保平安。3bM

二、采精的操作规程（徒手采精法）3bM

1. 采精员一手带乳胶手套，另一手持 37 ℃保温杯（内装一次性采精袋）用于收集精液。3bM

2. 采精员将待采精的公猪赶至采精栏，用温水（夏天用自来水）将公猪的下腹部清洗干净，挤出公猪包皮积尿，再用毛巾擦干。3bM

3. 按摩公猪包皮部，抚慰其爬跨假台畜。3bM

4. 公猪爬跨假台畜并逐步伸出阴茎，用带有乳胶手套的手，将公猪阴茎龟头导入空拳。3bM

5. 用手紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头 , 顺势将阴茎拉出 , 握紧阴茎龟头防止其旋转 , 公猪即可＊＊。3bM

6. 用二层沙布过滤收集浓份精液于保温杯内，最初射出的清亮局部，不必接取，一般情况下仅收集浓份精液；但在寒冷天气，采精时应注意采出精液的保温，可根据情况适当增大收集体积。3bM

7. 采精过程中，注意周围环境的恬静，防止影响采精的多余动作，直到公猪＊＊完之前，不可以松开采精的手。3bM

8. 采精员应注意安全，一旦公猪出现攻击行为，采精员应立刻逃至安全角。3bM

9. 下班之前完全清洗采精栏。3bM

10. 采精时间不准殴打公猪，防止公猪出现性抑制。3bM

11. 公猪采精调教： ? 后备公猪 7 月龄开始进行采精调教： ? 每次调教不超过 30 分钟； ? 一旦采精成功，分别在第 2 3 天再采精一次，进行巩固掌握该技术： ? 采精调教可采用发情母猪诱导、观摩有经验公猪采精、以发情母猪分泌物刺激等方法； ? 调教公猪要有耐心，不打骂公猪； ? 注意公猪和调教人员的平安。3bM

12. 采精频率： 8-12 月龄公猪每周 1 次； 12-18 月龄青年公猪每 2 周采 3 次； 18 月龄后每周采 2 次。所有采精公猪即使精液不使用时，每周也应采精一次，以坚持公猪＊＊和精液质量。3bM

三、稀释液配制操作规程3bM

1. 为了保证质量，稀释精液都使用商品精液稀释剂，稀释后将其保存在 17 ℃ 的恒温冰箱中。3bM

2. 根据当天精液生产计划，确定精液稀释液的配制量，从冰箱中取出相应的精液稀释剂，置于室温中。3bM

3. 把一次性稀释液袋套入稀释容器中，用电子称准确称取 1000ml 或 2000ml 蒸馏水，将 1 1 规格使用的精液稀释剂完全倒入相应的蒸馏水中，磁力搅拌机用磁力搅拌器搅拌 30 分钟，以帮助稀释剂助溶解。3bM

4. 溶解后，置于 37 ℃恒温水浴槽中加热。3bM

5. 将配制好的稀释液放入 37 ℃ 的恒温水浴槽中，确保使用前加热到 37 ℃ 。3bM

6. 稀释液应在配制好的 1 小时后使用，以保证其中的 PH 值和渗透压以及其它离子浓度达到稳定；没有使用完的稀释液， 12 小时后，应弃之不用。3bM

四、精液品质的检查操作规程3bM

1. 精液量：以电子天平称量精液，按每克 1 毫升计。3bM

2. 颜色：正常的清液是乳白色或浅灰白，精子密度越高，色泽愈浓，其透明度愈低。如带有绿色或黄色是混有尿液，若带有淡红色或红褐色是含有血液，这样的精液应舍弃不用。3bM

3. 气味：猪精液略带腥味，如有异常气味，应废弃。3bM

4. 精子活力是指呈直线运动的精子百分率，显微镜下观察精子活力，原精一般按 0-5 分评分，一般要求原精活力在于 2 分以上可以进行稀释，稀释后精液活力在 70% 以上进行分装；贮藏精液活力在 60% 以上使用。3bM

5. 精子密度：指每亳升精液中所含的精子数，确定稀释倍数的重要指标。要求用专用精液密度仪测定。输精浓度过低会造成产仔数降低，浓度过高将影响到精液的保管期缩短。3bM

6. 精子畸形率 : 畸形率是指异常精子的百分率 , 一般要求畸形率不超过 20 ％ . 畸形精子种类很多 , 如巨型精子、短小精子、双头或双尾精子，顶体膨胀或脱落、精子头部完整或与尾部分离、尾部变曲。3bM

7. 按要求做好精液品质检查登记表。3bM

五、精液的稀释操作规程3bM

1. 精液采集后应尽快在 30 分钟内稀释完。3bM

2. 未经品质检查或检查不合格（活力 70 ％以下）精液不稀释，作好记录，精液废弃不用。3bM

3. 稀释液与精液要求等温稀释，两者温差不能超过 1 ℃ ，即稀释液应加热至 33 ℃ -38 ℃ ，以精液温度为标准来调节稀释液的温度，绝不能反过来操作。3bM

4. 稀释时，将稀释液沿盛精液的杯壁缓慢加入到精液中，然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒搅拌，使之混合均匀。3bM

5. 如作高倍稀释时，应先进行低倍稀释（ 1 1-2 稍待片刻后再将余下的稀释液沿壁缓慢加入。3bM

稀释倍数的确定：活率≥ 0.7 精液，一般按每个输精剂量含 40 亿个总精子，输精量为 80-90ml 确定稀释倍数，例如：某头公猪一次采精量是 200ml 活力为 0.8 密度为 2 亿 /ml 要求每个输精剂量是含 40 亿有效精子，输精量为 80ml3bM

总有效精子数 =200ml 2 亿 /ml 0.8=320 亿，3bM

稀释头份 =320 亿÷ 40 亿 =8 份，